Cell：科学家们开发出更精准、更高通量的分析基因新方法
西班牙卡洛斯三世心血管研究中心的科学家找到一个新方法来产生和研究基因嵌合体。在这些基因嵌合体中，相同组织可以含有不同的已知基因型的细胞群，能够允许研究这些基因型在细胞行为中的差异。发表在8月10日Cell上的新方法将允许任何研究人员在脊椎动物模型中多谱系基因嵌合体，如小鼠和斑马鱼。
这项技术将有助于提高对基因在发育和疾病中各个时空分辨率的功能和相互作用的理解。研究基因功能方法的改进将使研究人员能够增加了解基因组是如何构成我们身体的，和理解基因相互作用网络的知识，而且对设计出修改或纠正疾病相关基因活性的有效治疗策略是至关重要的。
改变基因活性的能力从根本上改变了研究生物过程的方法。今天，大多数研究人员一次分析一个基因的功能，通过改变它的活性，在一个器官、或动物中的所有细胞、或一个子集的细胞中增加它或消除它。通过这种方法，分析单个基因修饰在器官或动物中的发育、功能或疾病中产生的变化来获得对基因功能的理解。
文章的第一作者Rui Benedito解释使用基因嵌合体的实验方法，的基因变化只发生在一些生物体的细胞（突变细胞），而其他细胞保持不变（正常细胞）。他说：“型基因嵌合体的应用非常重要，因为它使我们能够在相同的中研究不同基因型的细胞如何作用，所以任何差异可以归因于的基因改变。”这种方法来研究基因的功能往往比经典遗传学更加精确和丰富。
由于果蝇易于进行有丝重组，遗传嵌合体在其中得到了广泛的应用，并彻底改变了基因功能和细胞生物学的研究。然而，迄今为止，在生物医学研究中应用最广泛的模型生物小鼠上和分析基因嵌合体在技术上更具挑战性。携带多个基因和调控元件的大型DNA结构对基因组的靶向存在技术困难。
为了在小鼠中产生基因嵌合体，科学家们开发出了新的生物学和转基因方法。这些方法允许在同一只小鼠同时多个嵌合体基因修饰，其不同荧光标记的表达可以用高分辨多光谱显微镜检测到。
为了让其他研究小组可以使用这些新的遗传工具，研究团队首先开发了一个开源的DNA工程策略，大大简化了含有多个靶基因和荧光标记基因的庞大而复杂的DNA构建过程。该团队还开发了新的CRISPR/Cas9方法介导这些DNA进入胚胎干细胞或受精卵，简单、快速和可靠地产生转基因小鼠的嵌合体。
有了这些新的遗传工具和转基因小鼠，研究团队能够用同步荧光显微镜观察多达15个颜色编码的细胞群，来研究相同组织的多个基因功能，每一个颜色表达独特的基因组合。据Rui Benedito说，“这项技术首次允许多个遗传嵌合体组合被，在相同的小鼠不同细胞中进行分析。因为不同的细胞群在同一个组织中被，并且可以同时成像，所以对它们行为差异的分析可以为研究基因的功能提供精确数据和新见解。这种方法与遗传分析的既定程序相比，具有实际的优势，因为这需要对不同组织或中存在的细胞进行比较，所以分析必须由具有或没有给定基因修饰的动物完成。
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